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PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。
原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。
细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过典酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。
染色步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗);
2. 蒸馏水洗;
3. 过碘酸酒精液10min;
4. 自来水冲洗10min;
5.Schiff氏液10min;
6. 流水冲洗5min;
7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化);
8. 流水冲洗5min;
9. 常规脱水、透明、封固。
结果
PAS阳性为红色,细胞核蓝色。
注意事项
1、高典酸溶液为透明溶液,配制后放4度冰箱备用,无法从常规的颜色辨别高典酸的好坏,需要定期更换;
2、染色试剂均应低温保存,临用前半小时取出恢复室温;
3、Schiff染液染色时间可随温度调整,室温高可减少染色时间,冬季室温低,可延长至20 min左右。
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