β - 半乳糖苷酶染色

日期：2025-11-07 返回

β - 半乳糖苷酶染色是一种用于检测细胞内 β - 半乳糖苷酶活性的技术，以下是其相关介绍：

原理

β - 半乳糖苷酶能将无色的 5 - 溴 - 4 - 氯 - 3 - 吲哚 - β - D - 半乳糖苷（X - Gal）分解成蓝色产物。在细胞内，如果存在 β - 半乳糖苷酶，它会作用于 X - Gal，使其产生蓝色沉淀，从而可以通过显微镜观察到细胞被染成蓝色，以此来判断细胞是否表达 β - 半乳糖苷酶以及该酶的活性情况。

实验步骤（以细胞水平的检测为例）

细胞固定：将培养的细胞用适当的固定液（如 4% 多聚甲醛）固定一段时间，通常为 15 - 30 分钟，以保持细胞的形态和酶的活性。

洗涤：用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤细胞，去除固定液和细胞表面的杂质，一般洗涤 3 次，每次 5 - 10 分钟。

染色：加入含有 X - Gal 的染色工作液，将细胞置于 37℃孵育一段时间，通常为 12 - 24 小时，具体时间根据细胞类型和 β - 半乳糖苷酶的表达水平而定。在孵育过程中，β - 半乳糖苷酶会将 X - Gal 分解产生蓝色产物。

终止反应：当观察到细胞出现明显的蓝色染色时，用 PBS 洗涤细胞，终止染色反应。

观察与分析：通过光学显微镜观察染色后的细胞，统计蓝色细胞的数量或分析蓝色染色的强度，以评估 β - 半乳糖苷酶的活性和表达情况。

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β - 半乳糖苷酶染色

原理

实验步骤（以细胞水平的检测为例）

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